[西北农林科技大学工程、网络技术人员招聘启事]西北农林科技大学工程、网络技术人员招聘启事 一、岗位及人数 1、工程训练中心工程技术2--3名； 2、网络中心计算机网络技术3—5名。 二、招聘范围 工科院校200 8、2009届全日...+阅读
(1)获得目的基因的方法：①从基因文库中获取 ②利用PCR技术扩增 ③人工合成（化学合成）.
(2)基因表达载体的结构组成：启动子、目的基因、终止子、标记基因复及制原点.
(3)农杆菌转化法是指将目的基因插入农杆菌的Ti质粒上的T-DNA上，通过农杆菌的转化作用，就可以使目的基因进入植物细胞，并将其插入植物细胞中染色体的DNA上，使目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达.检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行
抗原-抗体杂交，若有杂交带出现，表明目的基因已形成蛋白质产品.
(4)植物组织培养技术，在整个实验中要保持无菌无毒环境.所用的培养基是固体培养基及成分有无机成分（水和无机盐）、有机营养成分、激素、琼脂.（5）若想利用植物组织培养技术得到细胞产物，只需培养到愈伤组织即可.若想制造人工种子，需要培养到胚状体.（在胚状体外包一层人工种皮即可）（6）植物组织培养技术的原理：植物细胞的全能性.
故答案为：
(1)从基因文库获取目的基因、利用PCR技术扩增目的基因
(2)启动子、终止子
(3)T-DNA（可转移的DNA） 抗原-抗体杂交
(4)激素（植物生长调节剂）
(5)胚状体 愈伤组织
(6)细胞的全能性
现代生物科技专题人们应用生物工程技术可以获得所需要的生物新
PCR技术 反转录（或DNA合成仪）
(2)Ca2+ 原核细胞没有内质网及高尔基体； ，使大肠杆菌变成感受态细胞.大肠杆菌是原核生物，只有一种细胞器--核糖体； ，增大细胞壁的通透性，进而提取单克隆抗体.
(4)单克隆抗体还可以通过培养由浆细胞和骨髓瘤细胞融合而成的杂交瘤细胞进行大量制备.将动物细胞融合常用的诱导剂是灭活的病毒和PEG.
故答案为：
(1)从基因文库中获取 ，没有内质网及高尔基体，对蛋白质不能进一步加工.
(3)利用基因工程生产单克隆抗体时，一般采用显微注射技术将无限增殖基因导入浆细胞（或已免疫的B淋巴细胞）中，然后进行克隆化培养和专一抗体检测筛选出分泌所需抗体的特定细胞进行扩大培养（1）获得抗虫基因的常用方法是从基因文库中获取.PCR技术可以大量扩增目的基因.获取人胰岛素基因还可通过反转录（或DNA合成仪）法进行人工合成.
(2)Ca2+处理大肠杆菌；浆细胞（或已免疫的B淋巴细胞） 克隆化培养 ，对蛋白质不能进一步加工
(3)显微注射
高中生物选修3现代生物科技专题的全部知识点归纳总结
专题五 细胞工程 一 植物细胞工程 【课标扫描】 简述植物组织培养。 【考试说明要求】 植物的组织培养（B级） 【知识网络】 【重点难点】 一.细胞的全能性
（1）原因：生物体的每一个细胞都含有本物种的全套遗传物质，都有发育成完整个体的全套基因。
（2）表现全能性的条件：离体、提供营养物质、激素及其他适宜条件。
（5）全能性的比较：受精卵>生殖细胞>体细胞；植物细胞>动物细胞（动物细胞全能性受限制，但细胞核仍具全能性）；增殖细胞>不增殖细胞。
（6）应用：利用植物细胞的全能性，通过植物组织培养的方法，快速繁殖花卉和蔬菜等作物，拯救珍稀濒危物种，还可与基因工程结合培育作物新品种。
二、植物细胞工程的基本技术 1.组织培养的过程可概括如下： 2.植物体细胞杂交技术
（1）原理：细胞膜的流动性、植物细胞的全能性
（2）过程：
（3）植物体细胞杂交过程必须弄清的几个问题 ①植物体细胞杂交的开始、结束、生殖方式？ 植物体细胞杂交是用两个来自于不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植株的方法。从这句话可以看出，植物体细胞杂交是从细胞融合开始，到培育成新的植株结束。其生殖方式为无性生殖。 ②植物体细胞杂交的实质是什么？ 不同植物细胞的原生质体的融合。 ③植物体细胞融合的障碍和融合完成的标志分别是什么？ 障碍：细胞外的细胞壁； 标志：产生新的细胞壁。 ④形成融合细胞的类型有哪些？ 体细胞融合成功以后，既有AB型杂种细胞，还能形成AA型和BB型两种融合细胞，但只有AB型细胞是植物体细胞杂交所形成的杂种细胞，因此在杂种细胞形成后还应有一个筛选过程。 ⑤植物体细胞杂交育种的优点和局限性分别是什么？ 优点：植物体细胞杂交的最大突破是克服了远缘杂交不亲和的种间或属间障碍； 局限性：由于目前仍有许多理论和技术问题没有解决，不能让杂种植株按照人们的需要表现出亲代的优良性状。
（4）植物细胞杂交与传统细胞杂交比较： 比较项目 传统杂交 细胞杂交 依据 杂种优势 细胞全能性、原生质体融合 过程 自然发生，在母体完成胚发育 人工诱导融合，需组织培养 本质 精、卵两种生殖细胞结合，完成遗传物质的重新组合 不同生物的体细胞融合和完成遗传物质的融合 优点 杂种第一代生长整齐、植株健壮、产量高、抗虫抗病能力强 克服远源杂交不亲和障碍，实现不同种间的杂交 缺点 存在生殖隔离；杂种第二代会出现生长不齐、产量下降等现象 很多理论、技术问题未解决，距离推广应用有一定差距 目的 获得杂种优势，提高产量 获得优良性状 意义 自然发生、方便生产 扩展了用于杂交的亲本组合 应用范围 种内 种内、种间均可回答人的补充 2011-02-04 10:09 二.动物细胞工程 【课标扫描】 1.简述动物的细胞培养与体细胞克隆。 2.举例说出动物细胞融合与单克隆抗体。 【考试说明的要求】 1.动物的细胞培养与体细胞克隆（A级） 2.细胞融合与单克隆抗体（A级） 【知识网络】 【重点难点】
一、动物细胞培养 1.原理：细胞增殖 2.动物细胞培养过程
（1）选材：动物胚胎或幼龄动物的组织、器官，它们细胞增殖能力强，分裂旺盛，分化程度低，容易培养。
（2）动物细胞培养流程：
（3）生长特点： ①贴壁生长：培养瓶中的悬浮液细胞，紧贴培养瓶内壁才能生长。 要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。 ②接触抑制：当培养瓶中内壁生长细胞彼此紧密接触时，细胞不再分裂。 3.动物细胞培养和植物细胞培养比较： 动物细胞培养 植物细胞培养 原理 细胞的增殖 细胞的全能性 细胞来源 胚胎或幼龄动物组织或器官 离体植物器官、组织或细胞 培养 基 状态 液体 固体 成分 天然培养基 合成培养基 组成 葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清 矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、有机添加物 器皿 培养瓶 锥形瓶 过程 原代生长，传代生长 更换培养基，细胞增值分化 生长特点 贴壁生长，细胞增值不分化 诱导形成愈伤组织，细胞增值分化 细胞进行异养需氧代谢 接种前处理 灭菌、用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞 灭菌 培养条件 恒温、无菌、无需光照 常温、无菌、光照条件 培养目的 1.生产蛋白质生物制品 2.获取大量细胞 3.检测有毒物质 1. 快速繁育无病毒植株 2. 生产药物、食品添加剂、香料、色素、杀虫剂等 培养结果 细胞株→细胞系 愈伤组织→植株
二、动物体细胞核移植技术和克隆动物 1体细胞核移植的过程必须弄清的几个问题 ①动物细胞的全能性会随着动物体的发育而逐渐受到限制，其主要原因是什么？ 细胞分化 ②克隆高产牛所用的受体细胞是什么？为什么？ 去核的卵母细胞，处于减数第二次分裂中期。因为卵母细胞中含有促使细胞核表达全能性的物质和营养条件。 ③克隆高产牛过程所利用的生物技术有哪些？ 细胞核移植、动物细胞培养、胚胎移植 ④目前核移植技术中普遍使用的去核方法是什么？ 显微操作法 2.体细胞核移植技术存在的问题
（1）成功率非常低：产下的活克隆动物占移植克隆胚胎的比率平均不到10%。 (2)存在健康问题：许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷，如体型过大、异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫失调等。 ...
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